（一）转染cGAMP测试结果：

• （二）产品描述：
  

  cGAS-STING是先天免疫系统的一个组成部分，其功能是响应胞质DNA 的存在，并触发炎症基因的表达，从而激活防御机制。 通常DNA存在于细胞核中，胞质DNA通常与病毒感染、细菌入侵以及肿瘤发生有关。在这条通路中，环 GMP-AMP 合酶 (cGAS) 可被胞质DNA激活，从而触发 GTP 和 ATP 反应形成环 GMP-AMP (cGAMP)。 产生的cGAMP 与干扰素基因刺激物 (STING) 结合，并通过TBK1触发 IRF3磷酸化。然后 IRF3 可以进入细胞核以触发IRSE相关基因，如IFN-β、CXCL10等的转录表达，从而快速启动天然免疫及适应性免疫进程。与正常细胞不同，癌细胞通常充满细胞溶质 dsDNA。这种 DNA 可以来自多种来源，包括基因组、线粒体和外源性来源。最近的证据表明，染色体不稳定性 (CIN) 是胞质 dsDNA 的主要来源。然而由于一系列突变或表观遗传学修饰等，肿瘤细胞通常cGAS-STING信号通路激活缺陷。作为典型得模式细胞，293T由于其操作简单，转染便利，为此我们构建了人STING稳定过表达细胞模型，用于该信号通路得研究。本品为稳转人STING细胞系，用于cGAS-STING信号通路的研究。

• （三）产品参数：

  
  

  产品名称	hSTING过表达细胞系（293T）
  细胞抗性	嘌呤霉素
  产品货号	C0010-01

  
  

• （四）培养方法：

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  培养基：
  

  DMEM(high glucose)+10% FBS＋1% ampicilin/streptomycin + 2 μg/ml puromycin

  
  

  细胞复苏：

  为保证较高的复苏效率，收到细胞后（干冰运输）宜进行立即复苏培养。首先将培养基置于37℃水浴10分钟以上备用，在穿戴护目镜、防护服及防护手套等安全的条件下取出细胞样品管立即浸入37℃温水中，并不时摇动使其迅速融化。于生物安全柜中将细胞转入含10ml 完全培养基的试管中，室温下800RPM离心3分钟，使用10ml培养基重悬细胞后置于10 cm培养皿等培养介质中进行培养（37℃，5%CO₂）。

  
  

  细胞消化及传代：

  由于293T细胞贴壁不牢，所有操作应轻柔，当细胞在培养皿内长满达到80％时即按1：3~5的比例进行传代。当细胞100%铺满后极易整体剥脱，因此不宜生长过密。首先吸去旧培养基，加入10ml经37℃温育的PBS轻轻洗涤一次后吸去，加入1ml0.05%胰蛋白酶，来回轻微晃动使得液体铺满培养瓶，37℃温育直到细胞完全脱落（3分钟内），加入10mlDMEM完全培养基，使用电动移液器轻轻混匀，转入试管中800RPM离心3分钟后培养基重悬传入3~5皿新培养皿中继续培养。