（一）标准曲线及不同样本测试结果：

• （二）分析原理：
  

  丙酮酸是体内糖脂代谢过程中极为关键的中间物质。糖酵解过程最终可产生丙酮酸，而后产生乙酰辅酶A，通过线粒体氧化磷酸化产能，亦可合成脂肪酸或者进入糖异生。在某些情况下丙酮酸可转化为丙氨酸以及乙醇。丙酮酸也可以作为信号分子参与调控细胞内信号转导通路。因此，检测细胞内丙酮酸水平可以恰当反应其能量代谢及细胞信号过程。生物样本中丙酮酸浓度可以通过多种方法测得，如HPLC、化学法以及NADH欧联酶法来测量。然而，HPLC法受限于其速度快、有机溶剂消耗量大、灵敏度低等问题。化学方法如利用硝基苯肼转化为生色的苯腙类化合物，该方法仅能测定总体的酮酸水平，而无法特异性地检测丙酮酸含量。另外NADH法则灵敏度较低且稳定性差，需要紫外检测仪等不足之处。我们研发的丙酮酸比色分析盒提供了一种方便快捷的方法来检测血清及组织细胞样品中丙酮酸的水平。在该测定中，丙酮酸在丙酮酸氧化酶存在下通过酶促反应转化为乙酰磷酸、二氧化碳和过氧化氢，随后通过一系列酶促反应生成570 nm 处具有强吸收的有色产物，由于其吸光度与样品中存在的 丙酮酸含量成正比，从而可用于检测计算丙酮酸水平。

• （三）产品描述：

  本产品【丙酮酸定量分析（比色法），货号：A0011】可以用于检测生物样品中丙酮酸的水平。细胞和组织样品经一步裂解后离心即可完成样品的制备，检测灵敏度高达0.5纳摩尔，所获得的样品裂解液仍可进行BCA蛋白定量及Western blot检测分析。本试剂盒具有如下特征：

  （1）样品制备简单。试剂盒提供了可以用于细胞和组织裂解的丙酮酸裂解缓冲液，而无需进行高氯酸等去蛋白抽提等繁琐操作。

  （2）灵敏度高，在0.5至10纳摩尔范围内有良好检测效果。本试剂盒在样品体积为100微升时可以检测浓度低达5μM的丙酮酸。如样品浓度所在区间预先未知，可进行一定稀释比例的预实验，使样本读数位于该区间范围内。

  （3）读数稳定。经优化设计，本试剂盒整体反应稳定可靠，试剂盒可开展时间动力学分析，从而获得最优的检测时间点。

  （4）较高的样品兼容性。本试剂盒中含有丙酮酸裂解缓冲液，经该裂解液获得的样品，不仅可以用于丙酮酸检测，还可用于BCA法检测蛋白浓度、进行SDS-PAGE以及一些可溶性蛋白的Western blot检测。

  （5）检测方便快捷。本产品无需繁琐的样品准备及复杂的分析流程，通常20个样品可以在1小时内测定完毕（含37°C孵育15-30分钟）。

• （四）试剂盒组成及储存条件：
  

• Components	50 tests	100 tests	200 tests	Storage
  Pyruvate Lysis Buffer	1 × 30 mL	1 × 60 mL	1 × 120 mL	4 °C
  Pyruvate Assay Buffer	1 × 30 mL	1 × 60 mL	1 × 120 mL	4 °C
  Pyruvate Enzyme mix	1 × 3 mL	1 × 6 mL	1 × 12 mL	-20 ºC
  Pyruvate Probe	1 × 0.3 mL	1 × 0.6 mL	1 × 1.2 mL	-20 ºC
  Pyruvate Standard	1 × 0.5 mL	1 × 1 mL	1 × 2 mL	-20 ºC

• （五）分析平台及产品参数：
  

  （1）分析平台：

                  带570nm波长吸光度酶标仪，标准透明底96孔酶标板。

  （2）产品参数：

  l  产品名称	丙酮酸定量分析试剂盒（吸光度法）
  l  分析方法	吸光度法（570nm波长）
  l  分析平台	光吸收酶标仪（96孔板）
  l  有效期	12个月
  l  检测区间	>0.5纳摩尔
  l  产品货号	A0011-01（50次） A0011-02（100次） A0011-03（200次）